Inmovilización del gen BCR-ABL en un sustrato conductor de carbono recubierto por una capa de oro para la detección del leucemia mieloide crónica en el laboratorio de Biotechcell SAC, 2024

Abstract

La leucemia mieloide crónica (LMC) es una neoplasia hematológica asociada a la presencia del gen de fusión BCR-ABL, cuyo diagnóstico temprano es fundamental para el tratamiento oportuno. En este contexto, el presente trabajo desarrolla un biosensor electroquímico basado en un sustrato conductor de carbono recubierto con oro para la detección de ADN mediante espectroscopía de impedancia electroquímica (EIS). Inicialmente, se formularon los modelos de impedancia del circuito de Randles en sus configuraciones ideal y real, los cuales fueron simulados para analizar el comportamiento electroquímico del sistema y establecer condiciones experimentales adecuadas. A partir de estos resultados, se diseñó un protocolo de inmovilización del ADN sobre la superficie del electrodo. Se evaluaron dos protocolos experimentales, donde el primero no evidenció variaciones significativas en la resistencia de transferencia de carga (Rct), mientras que el segundo permitió obtener una respuesta electroquímica diferenciada. Se analizaron condiciones de Perfect Match (PM), Mismatch (MM) y control (PBS 1X). Los resultados mostraron un incremento significativo de Rct en las muestras PM, asociado a la hibridación específica del ADN, mientras que en las condiciones MM y control no se observaron variaciones relevantes, evidenciando la selectividad del sistema. Asimismo, se estableció una relación cuantitativa entre la concentración de ADN, determinada mediante fluorometría (Qubit), y la respuesta impedimétrica del biosensor, obteniéndose una correlación logarítmica con un coeficiente de determinación de R² = 0,9468, en un rango de 300 a 2000 ng/mL, lo que evidencia la capacidad del sistema para la inmovilización, detección y cuantificación electroquímica del gen BCR-ABL.